?典型的傳統(tǒng)細菌計數(shù)方法兩大不足之處
典型的傳統(tǒng)細菌計數(shù)方法主要有平板計數(shù)法和最大或然計數(shù)法(MPN法)等等,這些方法均在固體或液體培養(yǎng)基中對待測菌種進行培養(yǎng),然后根據(jù)培養(yǎng)后顯現(xiàn)出的宏觀結果(例如菌落密度(平板計數(shù)法)、液體培養(yǎng)基的顯色情況(MPN法))來判斷原始樣品中的活菌濃度。這些方法普遍存在以下兩個最主要的不足之處。
(1)培養(yǎng)時間長。細菌對培養(yǎng)基的適應以及細菌的生長繁殖都需要一定的時間,所以產生可觀測到的結果需要較長的時間,通常在24 h以上甚至一周左右。
(2)培養(yǎng)條件對結果影響大。傳統(tǒng)方法中,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間等對檢測結果都有很大的影響,一種培養(yǎng)基往往僅能檢測出一種或數(shù)種能夠在該培養(yǎng)基中生存的細菌的數(shù)目,這只占實際細菌數(shù)量的極少部分,例如通常的平板計數(shù)只能檢測到水中細菌數(shù)目的0.1%~10%,從而大大影響了結果的準確性。表1給出了應用平板計數(shù)法對各類水樣中的細菌進行計數(shù)時,所能檢測到的細菌數(shù)占實際細菌數(shù)的比例。
傳統(tǒng)活菌計數(shù)方法的上述缺點,在很大程度上限制了其在環(huán)境微生物學中的應用范圍。另外,水樣中的細菌種類繁多,不可能也沒有必要在任何情況下都分門別類地對各種細菌都單獨培養(yǎng)計數(shù)。而且,在實際情況下,一個有限范圍內的各種細菌之間不可避免地發(fā)生著相互作用,水體的宏觀微生物學特性是它們共同作用的結果。而所有的傳統(tǒng)技術在培養(yǎng)過程中都將細菌置于偏離它們原來的小環(huán)境的、新的人為的操縱條件下,使其形成與原來并不完全相同的群落結構,甚至引起細菌偏離在自然狀況下的生理習性,從而不能反映出它們的實際生長情況。因此,通過任何傳統(tǒng)活菌計數(shù)技術都不能全面客觀地認識水體微生物特性。
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