忍冬提取液對(duì)酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞形態(tài)和生物膜形成能力的影響（三）
2.結(jié)果與分析
2.1忍冬不同部位總酚、總黃酮和綠原酸含量
對(duì)金銀花、忍冬葉和忍冬藤的總酚、總黃酮和綠原酸含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明忍冬葉和金銀花生物活性成分含量相接近，但忍冬藤中活性成分顯著低于金銀花和忍冬葉（P<0.05，圖1）。忍冬不同部位總酚含量依次為金銀花>忍冬葉>忍冬藤，金銀花總酚含量為20.29 mg/g，是忍冬葉和忍冬藤含量的109.68%、272.72%；忍冬不同部位總黃酮含量依次為忍冬葉>金銀花>忍冬藤，忍冬葉總黃酮含量為43.32 mg/g，是金銀花和忍冬藤的108.81%、291.13%；金銀花綠原酸含量與忍冬葉無(wú)顯著差異（P>0.05），分別為12.86、11.29 mg/g，但均顯著高于忍冬藤綠原酸含量（P<0.05）。章艷玲比較了忍冬不同部位中黃酮類化合物含量，表明忍冬葉的黃酮類化合物最多，其次是金銀花，忍冬藤含量最少；路俊仙等在測(cè)定忍冬不同部位化學(xué)成分含量時(shí)也發(fā)現(xiàn)金銀花和忍冬葉中綠原酸含量高于忍冬藤；這些研究與本研究結(jié)果相一致。另外，有文獻(xiàn)報(bào)道，忍冬藤提取物對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞分泌的炎癥因子具有顯著的抑制作用，促進(jìn)骨折愈合，并具有較好的抗炎效果。因此，進(jìn)一步對(duì)忍冬藤生物活性成分挖掘?qū)﹂_(kāi)發(fā)忍冬資源具有重要意義。由此可見(jiàn)，研究金銀花、忍冬葉和忍冬藤中活性成分對(duì)提高忍冬附加值具有重要意義。
圖1忍冬不同部位生物活性物質(zhì)含量
注：不同小寫字母表示在不同部位同一物質(zhì)間差異顯著（P<0.05）。
2.2忍冬不同部位提取液抑菌譜
金銀花、忍冬葉和忍冬藤提取液具有廣譜的抗菌性，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌均有一定的抑菌效果（表1）。金銀花和忍冬葉提取液對(duì)A.acidoterrestris、S.agalactiae、L.monocytogenes、S.aureu、B.subtilis、E.coli和Salmonella均有一定的抑制作用。其中對(duì)A.acidoterrestris的抑制效果最強(qiáng)；對(duì)S.agalactiae、L.monocytogenes和S.aureus亦為敏感；對(duì)B.subtilis、E.coli和Salmonella也顯示出一定的抑制作用，且忍冬葉對(duì)A.acidoterrestris的抑制作用與金銀花無(wú)顯著性差異（P>0.05）。忍冬藤提取液對(duì)A.acidoterrestris的抑菌效果略差于金銀花和忍冬葉，對(duì)S.agalactiae、L.monocytogenes、S.aureus和E.coli顯示出一定的抑菌特性，但抑菌效果低于金銀花和忍冬葉。Xiong等研究表明，忍冬葉對(duì)S.aureus和E.coli有顯著的抗菌活性，且對(duì)S.aureus的抑菌效果更強(qiáng)，與本研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果表明忍冬不同部位提取液對(duì)A.acidoterrestris抑菌效果較強(qiáng)，尤其是金銀花和忍冬葉提取液。但忍冬提取物對(duì)A.acidoterrestris的抑菌特性鮮有報(bào)道。因此，本文接下來(lái)進(jìn)一步研究金銀花和忍冬葉提取液對(duì)A.acidoterrestris的抑菌特性。
表1忍冬不同部位提取液抑菌圈直徑
注：L.acidophilus、L.plantarum、L.rhamnosus、A.acidoterrestris、S.agalactiae、L.monocytogenes、S.aureus、B.subtilis為革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）；E.coli、Salmonella、C.jejuni為革蘭氏陰性菌（G?）。抑菌圈打孔直徑為6 mm，在抑菌圈直徑=6 mm時(shí)，表示抑菌作用實(shí)際為0；抑菌圈直徑>12 mm為菌種對(duì)藥物高敏感；9~12 mm為中敏感；6~9 mm為低敏感；=6 mm為不敏感。不同大寫字母表示同一部位不同菌株間差異顯著（P<0.05），不同小寫字母表示不同部位同一菌株間差異顯著（P<0.05）。
忍冬不同部位提取液對(duì)菌株抑菌作用具有差異性的研究亦有報(bào)道。Yan等研究表明忍冬藤提取液對(duì)S.aureus的抑菌效果比金銀花和忍冬葉提取液弱；任敏等發(fā)現(xiàn)忍冬藤提取物對(duì)S.aureus的抑菌作用最弱，這與本研究結(jié)果一致。金銀花、忍冬葉和忍冬藤的抑菌效果存在差異，可能是因?yàn)槿潭煌课恢饕锘钚晕镔|(zhì)不同，雖然金銀花和忍冬葉均含一定量的多酚、黃酮和綠原酸類活性物質(zhì)，但其單體化合物存在差異，導(dǎo)致其對(duì)菌株的敏感性不同。有文獻(xiàn)報(bào)道，金銀花中的化學(xué)成分種類更多，其中蘆丁和異綠原酸B只在金銀花中檢測(cè)到，而金銀花和忍冬葉中均含有綠原酸、異綠原酸A和異綠原酸C，但忍冬藤中異綠原酸A和異綠原酸C含量較低。異綠原酸A具有比綠原酸更強(qiáng)的殺菌活性，原因是疏水相互作用和氫鍵都有助于異綠原酸A插入POPG脂雙層，并且奎寧酸部分是異綠原酸A中與POPG脂雙分子層形成氫鍵的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)。因此，金銀花和忍冬葉提取液中較高含量的多酚、黃酮和綠原酸等生物活性成分，使得其抑菌能力高于忍冬藤。
另外，忍冬提取液雖然對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌敏感，但對(duì)L.acidophilus、L.plantarum和L.rhamnosus這三株益生菌均無(wú)抑制特性，這對(duì)忍冬精深加工及藥物開(kāi)發(fā)具有重要意義，其機(jī)理特性有待于進(jìn)一步研究。
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