高齡婦女的生育能力下降，LED光照或能改善卵巢功能
新型光源-發(fā)光二極管作為光治療的一種新手段在健康和醫(yī)療中的應(yīng)用尚處于起步階段，且近年來隨著國內(nèi)LED芯片技術(shù)的快速提高，新型LED光源因壽命長(zhǎng)、光譜窄、產(chǎn)熱低、光電轉(zhuǎn)化率高等優(yōu)勢(shì)使其開始被應(yīng)用于健康和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，并且快速發(fā)展。尤其在代謝、心血管、神經(jīng)、皮膚及免疫系統(tǒng)疾病，LED無創(chuàng)光療對(duì)能夠起到防治和輔助性治療的作用，臨床需求巨大。
光療作為一種有效的治療手段，在臨床和工程上正得到越來越廣泛的應(yīng)用，其理論基礎(chǔ)是生物組織吸收光能并將光能轉(zhuǎn)化為熱能和化學(xué)能，從而導(dǎo)致體內(nèi)產(chǎn)生一系列的化學(xué)反應(yīng)，這些化學(xué)反應(yīng)包括光致分解、光致氧化、光致聚合和光致敏化，LED作為一種新型光源，隨著光的生物效應(yīng)逐步被人們所認(rèn)識(shí)，正逐步應(yīng)用于醫(yī)學(xué)中并發(fā)揮積極的作用。
當(dāng)前女性晚婚晚育趨勢(shì)增加，高齡婦女的生育能力下降成為了一個(gè)嚴(yán)峻的社會(huì)和醫(yī)學(xué)挑戰(zhàn)。
綜上所述的問題，為此，提出一種窄帶LED光設(shè)備及使用該LED光照改善卵巢功能的方法。
窄帶LED光設(shè)備的LED光照改善卵巢功能的方法，包括以下步驟：
步驟S1、小鼠選擇和分組：
第一部分選用7月齡C57雌鼠，第二部分選用2月齡C57雌鼠，并將小鼠隨機(jī)分為自然光對(duì)照組和不同波長(zhǎng)LED光照射組，每組6只小鼠，在新環(huán)境中適應(yīng)一周后將小鼠背部剃毛，確定照射位置并標(biāo)記；
步驟S2、窄帶LED光設(shè)備的組裝，以及設(shè)置；
步驟S21、將實(shí)驗(yàn)鼠透明罩505放置入LED光源架501的實(shí)驗(yàn)腔504內(nèi)部；
步驟S22、將小鼠放置入實(shí)驗(yàn)鼠透明罩505的內(nèi)部，再通過轉(zhuǎn)柄508轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)螺桿507推動(dòng)實(shí)驗(yàn)鼠壓板506移動(dòng)，使得實(shí)驗(yàn)鼠壓板506將壓力作用于小鼠，將小鼠壓在實(shí)驗(yàn)鼠透明罩505的內(nèi)部；
步驟S23、在50mw光功率密度下，用不同波長(zhǎng)的LED照射燈503LED光照射小鼠5min，連續(xù)照射15天，模擬臨床治療3個(gè)療程；
步驟S3、將處理后的雌鼠通過陰道抹片檢測(cè)發(fā)情周期；
步驟S4、雌鼠激素測(cè)定；
步驟S41、LED光照射結(jié)束后，在小鼠處于發(fā)情間期時(shí)，對(duì)小鼠行眼眶采血，收集到1.5mL離心管中靜置，4℃過夜，3500rmp離心5min，吸取上層血清，-80℃凍存；
步驟S42、用放射免疫法測(cè)定血清中檢測(cè)血清中促卵泡生成激素(FSH)、促黃體生成激素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睪酮(T)、催乳激素(PRL)、AMH激素水平；
步驟S5、卵巢組織采集和組織學(xué)評(píng)估；
步驟S51、在取血后，將小鼠安樂處死，取出卵巢組織，一個(gè)卵巢凍到-80℃冰箱，另一個(gè)卵巢進(jìn)行固定、包埋和切片處理；
步驟S52、對(duì)組織連續(xù)切片后進(jìn)行染色，對(duì)染色的連續(xù)切片進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)方法為每五張連續(xù)切片中，隨機(jī)選取一張對(duì)其中的卵母細(xì)胞(DDX4陽性)的數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；
步驟S53、將統(tǒng)計(jì)結(jié)果加和，再乘以校正數(shù)值(5)，即為最終的卵巢中各級(jí)卵泡數(shù)；
步驟S6、基因表達(dá)分析：
步驟S61、使用RT-PCR和RNA-seq技術(shù)，對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組卵巢組織的總RNA進(jìn)行基因表達(dá)分析；
步驟S62、使用免疫組化染色技術(shù)，檢測(cè)卵巢組織中標(biāo)記分子的分布情況；
步驟S7、后代評(píng)估：對(duì)產(chǎn)下的仔鼠每隔7天進(jìn)行拍照并觀察其狀態(tài)，并每隔7天測(cè)量仔鼠的體重，記錄體重?cái)?shù)據(jù)以便繪制生長(zhǎng)曲線，以評(píng)估仔鼠的生長(zhǎng)速度和趨勢(shì)；
步驟S8、數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計(jì)：對(duì)見栓率、懷孕率和產(chǎn)仔數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間的差異；
陰道栓檢查和配種實(shí)驗(yàn)檢測(cè)見栓率、懷孕率；
見栓率＝見栓雌鼠/總交配雌鼠
懷孕率＝產(chǎn)仔的雌鼠數(shù)/見栓的雌鼠數(shù)。
該設(shè)備檢測(cè)紅光到紅外波段的窄帶LED光對(duì)高齡卵巢功能及受孕能力的影響，數(shù)據(jù)表明630nm LED光，光功率密度為50mW，光照5min可以提高高齡小鼠的受孕能力和平均窩產(chǎn)仔數(shù)，提高AMH水平。
該設(shè)備檢測(cè)紅光到紅外波段的窄帶LED光療在促進(jìn)損傷子宮內(nèi)膜和薄型子宮內(nèi)膜修復(fù)方面的作用，結(jié)果表明630nm LED光，光功率密度為50mW，光照5min可以修復(fù)薄型子宮，使部分小鼠懷孕，但同時(shí)該條件下LED光照射可能會(huì)有一定程度的副作用，需要進(jìn)一步篩選合適的LED光波長(zhǎng)及光功率密度。
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