卡他布蘭漢菌分離、鑒定及藥敏結(jié)果
卡他布蘭漢菌(branhamella catarhalis,BC)或卡他莫拉菌(moraxella catarrhalis,MC)首次發(fā)現(xiàn)于1896年,曾一直被認(rèn)為是對(duì)人體無(wú)致病性的上呼吸道正常寄居菌。近年研究發(fā)現(xiàn),該菌不僅可以引起兒童和老年人的上呼吸道感染,而且還是引起成人下呼吸道感染的重要病原菌,且其發(fā)病率逐年增加,尤其多見(jiàn)于慢性阻塞性肺病患者。本文旨在對(duì)本院住院患者卡他布蘭漢菌分離及耐藥情況作一回顧性分析,以指導(dǎo)臨床合理用藥。
1資料與方法
1.1菌株來(lái)源
2013年—2014年從本院住院患者痰標(biāo)本中分離出卡他布蘭漢菌81株。其中分離自成人65株,兒童16株。成人患者中男性40例,女性25例,平均年齡77.6歲;兒童患者中男性5例,女性11例,平均年齡4.3歲。
1.2試劑與儀器
試劑:哥倫比亞血瓊脂平板購(gòu)自鄭州博賽生物技術(shù)股份有限公司;NH鑒定卡、嗜血桿菌和布蘭漢球菌藥敏試劑盒(ATB HAEMO);儀器:Biosense微生物生長(zhǎng)曲線監(jiān)測(cè)系統(tǒng)、ATB Expression,均購(gòu)自法國(guó)梅里埃公司;β-內(nèi)酰胺酶紙片購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司。
1.3菌株分離、培養(yǎng)與鑒定
將所取標(biāo)本仔細(xì)接種于血平板上,在35℃5%CO2孵箱中培養(yǎng)18~24h。對(duì)可疑菌落進(jìn)行分純,再通過(guò)革蘭染色、觸酶試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)等外部試驗(yàn),對(duì)純化后的菌落用NH鑒定卡在VITEK-2全自動(dòng)微生物分析儀上進(jìn)行菌株鑒定,用ATB HAEMO進(jìn)行藥敏試驗(yàn),并用β-內(nèi)酰胺酶紙片檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
應(yīng)用WHONET 5.6對(duì)藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,兒童與成人對(duì)抗菌藥物的耐藥率之間的顯著性比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
1.5質(zhì)控菌株流感嗜血桿菌ATCC 49247及大腸桿菌ATCC35218,購(gòu)自衛(wèi)生部臨檢中心。
2結(jié)果
2.1藥敏結(jié)果
檢出的81株卡他布蘭漢菌對(duì)大部分抗菌藥物保持較高的敏感性,耐藥(含中介敏感)率較高的抗菌藥物為氨芐西林、頭孢噻吩及復(fù)方新諾明,耐藥率分別為80.25%,46.91%及38.27%。成人65株,兒童16株,對(duì)11種抗菌藥物的耐藥率,成人與兒童比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。
2.2β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)結(jié)果
81株卡他布蘭漢菌共檢出β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性菌株65株,占80.25%。其中兒童分離株β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性15株,陽(yáng)性率為93.75%,與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)相近;成人分離株β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性50株,陽(yáng)性率為76.92%,低于國(guó)內(nèi)其他地區(qū),說(shuō)明該菌產(chǎn)酶率有地區(qū)差異。
3討論
卡他布蘭漢菌寄居在人或其他哺乳動(dòng)物的上呼吸道,一般不致病,當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí),可單獨(dú)或與其他菌株致病。卡他布蘭漢菌引起的中耳炎常發(fā)生在兒童,引起的下呼吸道感染常發(fā)生在老年人和免疫力低下的患者,尤其是慢性阻塞性肺病、支氣管擴(kuò)張、充血性心力衰竭患者。有報(bào)道稱(chēng),健康兒童中卡他布蘭漢菌攜帶率相對(duì)較高,如在呼吸道感染性疾病患兒中檢出,須謹(jǐn)慎判斷是否為病原菌。鑒于此,微生物實(shí)驗(yàn)室一方面應(yīng)做好痰涂片的工作,協(xié)助判斷是否為病原菌,另一方面,對(duì)培養(yǎng)出來(lái)的細(xì)菌,應(yīng)選擇有生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)的卡他布蘭漢菌進(jìn)行鑒定、藥敏并報(bào)告臨床。
卡他布蘭漢菌對(duì)大部分抗菌藥物保持較高的敏感性,其耐藥率較高的抗菌藥物為氨芐西林、頭孢噻吩及復(fù)方新諾明,與伊茂禮等報(bào)道相近。青霉素類(lèi)高耐藥率與該菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)。該菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶主要可分為BRO-1、BRO-2及BRO-3三類(lèi),這些酶為染色體基因編碼的脂蛋白,而且耐藥基因易于通過(guò)接合在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移。因此,對(duì)于混合細(xì)菌感染患者應(yīng)及早應(yīng)用有效的抗菌藥物,阻斷耐藥基因在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移。對(duì)產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶的MC株,即使藥敏實(shí)驗(yàn)對(duì)氨芐西林敏感也要避免應(yīng)用氨芐西林,因?yàn)榘逼S西林可誘導(dǎo)MC產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶。本研究及其他報(bào)道的數(shù)據(jù)表明,阿莫西林、氨芐西林等青霉素類(lèi)抗生素及頭孢噻吩、復(fù)方新諾明不宜用于卡他布蘭漢菌所致感染。
表1卡他布蘭漢菌對(duì)11種抗菌藥物的藥敏結(jié)果[株(%)]
綜上,目前卡他布蘭漢菌耐藥率較低,對(duì)大部分抗菌藥物保持較高的敏感性,臨床醫(yī)生多采用經(jīng)驗(yàn)用藥治療卡他布蘭漢菌感染。對(duì)卡他布蘭漢菌感染者,建議首選二、三代頭孢菌素或青霉素類(lèi)+酶抑制劑的復(fù)合制劑。此外,治療原發(fā)病,加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)支持療法增強(qiáng)抵抗力等亦十分重要。臨床應(yīng)重視卡他布蘭漢菌的分離培養(yǎng),并根據(jù)微生物實(shí)驗(yàn)室提供的藥敏結(jié)果指導(dǎo)用藥,減少耐藥菌株的產(chǎn)生。
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