普城沙雷菌對(duì)黃瓜生長(zhǎng)品質(zhì)、根際土壤微生物數(shù)量的影響（一）
植物根際促生細(xì)菌（plant growth promoting rhizobacteria，簡(jiǎn)稱(chēng)PGPR）是指自由存在于植物根際范圍中的一類(lèi)可促進(jìn)植物生長(zhǎng)、防治病害、增加產(chǎn)量的細(xì)菌的統(tǒng)稱(chēng)。PGPR菌株可通過(guò)溶磷、解鉀、固氮、產(chǎn)生植物激素等作用，直接促進(jìn)植物生長(zhǎng)，提高產(chǎn)量；還可以通過(guò)產(chǎn)生嗜鐵素和抗生素等抑制病原物的生存與繁殖，進(jìn)而減輕作物病害，改善植物根際土壤微生態(tài)環(huán)境，間接促進(jìn)植物生長(zhǎng)。如：從辣椒根際分離得到的具有產(chǎn)生IAA能力的枯草芽孢桿菌NJAU-G10能顯著促進(jìn)辣椒幼苗的生長(zhǎng)和根系發(fā)育；枯草芽孢桿菌QM3能顯著增加番茄植株葉片數(shù)，促進(jìn)番茄株高及根系發(fā)育，且有效防治番茄早疫病；在大豆根際同時(shí)接種慢生大豆根瘤菌和膠質(zhì)類(lèi)芽孢桿菌后，土壤酶活性顯著提高。由于PGPR具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)、防治植物病害和改善植物根際土壤微生態(tài)環(huán)境的優(yōu)良特性，因此，很多學(xué)者都積極投入到PGPR的開(kāi)發(fā)、應(yīng)用研究中。邱勤等研究指出，將PGPR菌劑施于土壤后，能顯著促進(jìn)苜蓿的生長(zhǎng)，同時(shí)增加土壤中細(xì)菌、真菌、放線(xiàn)菌等微生物的數(shù)量，進(jìn)而提高土壤養(yǎng)分。普城沙雷菌（Serratia plymuthica）A21-4是從洋蔥根際土壤中分離出的辣椒疫病生防菌，能有效定殖在辣椒根系及根際土壤，抑制辣椒疫病的發(fā)生，同時(shí)，能顯著促進(jìn)辣椒生長(zhǎng)，改善辣椒根際土壤微生態(tài)環(huán)境。
在前期普城沙雷菌對(duì)辣椒的促生作用研究的基礎(chǔ)上，本試驗(yàn)探究了普城沙雷菌對(duì)黃瓜生長(zhǎng)及根際土壤微生態(tài)環(huán)境的影響，以期為普城沙雷菌在黃瓜實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1材料與方法
1.1試驗(yàn)材料
普城沙雷菌的利福平標(biāo)記菌株（100μL·mL-1）由河南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害生物防治研究室在-80℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆茫稽S瓜品種為寒育6號(hào)（河南豫藝種業(yè)科技發(fā)展有限公司選育）；供試培養(yǎng)基為T(mén)SA培養(yǎng)基（Tryptic Soy Broth Difco.30 g，瓊脂18 g，蒸餾水1 000 mL）、AIA培養(yǎng)基（Actinomycete Isolation Agar Difco.22 g，蒸餾水1 000 mL）和PDA培養(yǎng)基（Potato Dextrose Broth Difco.24 g，瓊脂18 g，蒸餾水1 000 mL）。
1.2試驗(yàn)方法
本試驗(yàn)于2017年1～6月在河南省鄭州市毛莊綠園蔬菜基地進(jìn)行。1月17日在日光溫室穴盤(pán)播種育苗，2月17日移栽到大棚，施肥按照蔬菜基地常規(guī)管理進(jìn)行，6月15日拉秧結(jié)束。
1.2.1 普城沙雷菌菌懸液的配制及處理
將普城沙雷菌在TSA培養(yǎng)基上培養(yǎng)48 h后，用0.1 mol·L-1MgSO4無(wú)菌溶液配制成108cfu·mL-1的普城沙雷菌菌懸液。黃瓜育苗期和田間生育期分別用普城沙雷菌菌懸液處理，在育苗期，第1片真葉展開(kāi)時(shí)，用普城沙雷菌菌懸液進(jìn)行灌根處理（50 mL·株-1）；移栽10 d后再用普城沙雷菌菌懸液進(jìn)行灌根處理（200 mL·株-1），以清水處理為對(duì)照，每個(gè)處理設(shè)3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)150株（6行·重復(fù)-1，25株·行-1）。
1.2.2黃瓜生育指標(biāo)和生理指標(biāo)的測(cè)定
2月17日，即黃瓜播種后30 d，每個(gè)重復(fù)選9株，每個(gè)處理3次重復(fù)，測(cè)定黃瓜苗期株高、莖粗、地上部鮮質(zhì)量、根鮮質(zhì)量和第3片真葉的葉綠素含量；3月19日，即移栽后30 d，每個(gè)重復(fù)取5株，每個(gè)處理3次重復(fù)，測(cè)定黃瓜開(kāi)花期株高、莖粗、葉片數(shù)、葉面積和開(kāi)花數(shù)；在黃瓜苗期（2月17日）、開(kāi)花期（3月19日）、初果期（4月7日）、盛果期（5月2日）和采收后期（6月7日）分別測(cè)定根系活力。葉綠素含量的測(cè)定采用分光光度法，根系活力的測(cè)定采用氯化三苯基四氮唑法。
1.2.3黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定
黃瓜采收期，每個(gè)重復(fù)選取30株（6行·重復(fù)-1，5株·行-1），每個(gè)處理3次重復(fù)，采集黃瓜果實(shí)，采用稱(chēng)重法測(cè)定單株黃瓜果實(shí)質(zhì)量，直至結(jié)果期完結(jié)后，計(jì)算單株產(chǎn)量和每667 m2產(chǎn)量。黃瓜初果期、盛果期和采收后期分別測(cè)定品質(zhì)相關(guān)指標(biāo)，VC含量采用2，6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定，蛋白質(zhì)含量采用考馬斯亮藍(lán)G250法測(cè)定，可溶性糖含量采用蒽酮比色法測(cè)定。
1.2.4黃瓜根際土壤酶活性的測(cè)定
在黃瓜開(kāi)花期、初果期、盛果期和采收后期分別測(cè)定根際土壤脲酶、磷酸酶、過(guò)氧化氫酶和蔗糖酶活性。黃瓜根際土壤樣品的采集：輕輕撥開(kāi)黃瓜表層土壤，收集黃瓜根際土壤，過(guò)60目篩，每處理3次重復(fù)。脲酶活性采用苯酚鈉-次氯酸鈉比色法測(cè)定，磷酸酶活性采用磷酸苯二鈉比色法測(cè)定，過(guò)氧化氫酶活性采用高錳酸鉀滴定法測(cè)定，蔗糖酶活性采用3，5-二硝基水楊酸比色法測(cè)定。
1.2.5黃瓜根際土壤微生物數(shù)量的測(cè)定
在黃瓜開(kāi)花期、初果期、盛果期和采收后期分別測(cè)定黃瓜根際土壤細(xì)菌、真菌和放線(xiàn)菌的數(shù)量。土壤樣品的采集方法同1.2.4，根際土壤微生物的測(cè)定采用稀釋平板涂布法。稱(chēng)取1 g土樣，倒入裝有100 mL無(wú)菌水的三角瓶中，充分振蕩，然后用無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)渲瞥梢幌盗袧舛忍荻鹊南♂屢海瑢?.1 mL的稀釋液均勻涂布在含PCNB的TSA平板上，置于28℃恒溫箱中培養(yǎng)3 d后調(diào)查細(xì)菌數(shù)量；將0.1 mL的稀釋液均勻涂布在含乳酸的PDA平板上，置于26℃恒溫箱中培養(yǎng)5 d后調(diào)查真菌數(shù)量；將0.1 mL的稀釋液均勻涂布在含乳酸的AIA平板上，置于28℃恒溫箱中培養(yǎng)7 d后調(diào)查放線(xiàn)菌數(shù)量。調(diào)查細(xì)菌和真菌采用新鮮土樣，調(diào)查放線(xiàn)菌采用自然風(fēng)干的土樣。
1.2.6黃瓜根際土壤速效氮、磷、鉀的測(cè)定
在黃瓜開(kāi)花期、初果期、盛果期和采收后期分別測(cè)定黃瓜根際土壤速效氮、磷和鉀的含量。土壤樣品的采集方法同1.2.4，速效氮含量的測(cè)定采用堿解擴(kuò)散法，速效磷含量的測(cè)定采用碳酸氫鈉法，速效鉀含量的測(cè)定采用乙酸銨浸提，火焰光度法。
1.3數(shù)據(jù)處理與分析
采用Excel 2003和SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用Duncan氏新復(fù)極差法（SSR法）進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。
普城沙雷菌對(duì)黃瓜生長(zhǎng)品質(zhì)、根際土壤微生物數(shù)量的影響（一）
普城沙雷菌對(duì)黃瓜生長(zhǎng)品質(zhì)、根際土壤微生物數(shù)量的影響（二）
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