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嗜水氣單胞菌AH1在TSB培養基中的生長曲線測定結果

來源: 發布時間:2023-11-02 17:47:59 瀏覽:626 次

本文測定了嗜水氣單胞菌AH1在TSB培養基中的生長曲線進行研究,結果表明,該菌屬于一種生存能力較強的細菌,前期不易死亡,后期死亡較快。


測定與研究


嗜水氣單胞菌AH1的生長曲線


嗜水氣單胞菌AH1在TSB培養基中培養時,該菌落總數及0D600值隨時間變化曲線如圖1所示。從圖中可以看出,種子液接種后前4h嗜水氣單胞菌的菌落總數對數值相對較低,處于延滯期;4h之后菌落總數開始迅速上升,進入對數生長期,培養18h左右,培養基中的活菌落總數的對數值上升至最高峰達到7.3;19h至28h,嗜水氣單胞菌的菌落總數開始逐漸穩定,為穩定期;28h開始嗜水氣單胞菌AH1菌落總數對數值略為下降,進入衰亡期。該菌的OD600值在4h之后開始顯著地上升,這個上升期一直持續到19-20h,并在20h附近OD600達到最高峰1.8,而在30h后OD值又開始小幅下降。以上分析可得:嗜水氣單胞菌AH1在TSB培養基中培養時,0-4h屬于延滯期,期間細胞數目沒有顯著的增加,OD600的數值也幾乎為零;從4h起至18h,細菌處于對數生長期,菌體以幾何數增加,增長速度快,期間OD600迅速上升;19-28h是穩定期;第28h后進入衰亡期,此時OD600略有下降。

圖1菌落總數及吸光值(OD600)與時間的關系圖


嗜水氣單胞菌AH1生長過程中OD600與活菌數的關系


挑取單菌落接種于28℃的固體培養基中培養,一定時間后用TSB洗下菌苔,稀釋成不同的OD值,測其活菌數;如圖2所示為嗜水氣單胞菌在TSB中的活菌數與OD值的關系,從圖中可以看出,當OD600值小于1時,OD600值與其活菌數呈現出良好的線性關系(y=17.081x-0.226),因此當OD600值小于1時,可以準確地從表中讀出相對應的活菌數。


嗜水氣單胞菌AH1生長過程中pH值的變化


嗜水氣單胞菌AH1在TSB培養基中培養時,培養基的pH值隨培養時間的變化規律如圖3所示,由圖3的曲線可以看出,該菌在培養過程中產酸能力較強,在培養過程中培養基的pH值下降得非常快,培養時間為18h左右時,培養基的pH值降至最低,此時pH僅為6.3左右;培養時間在18-30h之間,培養基的pH趨于穩定;30h后,培養液的pH值略微上升并穩定在6.6。


嗜水氣單胞菌AH1在不同溶液中的生存時間的測定


嗜水氣單胞菌AH1分別保存于生理鹽水、PBS和TSB培養基中,置4℃條件下,間隔24h測定不同溶液中的細菌的活菌數,其結果如圖4所示。由圖4可看出,嗜水氣單胞菌AH1是一種生存能力較強的細菌,不管是在生理鹽水、PBS溶液還是TSB培養基中,前期都不容易死亡,后期則死亡較快。表明該菌抗逆性較強,給致病性的嗜水氣單胞菌的殺滅帶來了一定的難度。

圖2嗜水氣單胞菌AH1在生長過程中OD600值與活菌數的關系

圖3 pH值隨時間變化

圖4嗜水氣單胞菌AH1在不同溶液中的生存時間


結論


(1)嗜水氣單胞菌AH1在TSB培養基中培養時,0-4h屬于延滯期,期間細胞數目沒有顯著的增加,OD600的數值也幾乎為零;從4h起至18h,細菌處于對數生長期,菌體以幾何數增加,增長速度快,期間OD600迅速上升;19-28h是穩定期;第28h后進入衰亡期,此時OD600略有下降。


(2)在OD600值小于1.0的情況下,嗜水氣單胞菌AH1的OD600值與活菌數之間滿足線性關系y=17.081x-0.226,當OD600值小于1時,可以準確地從圖中讀出相對應的活菌數。


(3)嗜水氣單胞菌AH1的產酸能力較強,當培養進行了18h后培養基的pH值便會降至最低點6.3,當培養進行了30h之后,培養基的pH值會逐漸上升并穩定在6.6。嗜水氣單胞菌AH1的這一特點,可以為今后該病原菌的生理鑒定提供一定的參考與借鑒。


(4)嗜水氣單胞菌AH1是一種抗逆性比較強的細菌,若用生理鹽水、PBS或者TSB培養基培養該菌,其前期活菌數均不會發生明顯變化,后期則死亡較快。這表明該菌屬于一種生存能力較強的細菌,這給致病性的嗜水氣單胞菌的殺滅帶來了一定的難度。


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